微波綜合效應(yīng)
許多研究報(bào)告表明,微波與一般加熱滅菌方法相比,在一定溫度下細(xì)菌死亡時(shí)間縮短或在相同條件下滅菌致死溫度降低。這個(gè)事實(shí)是無法僅用熱致死理論來解釋的。因此,提出了微波殺菌機(jī)理的非熱效應(yīng)理論。在此基礎(chǔ)上,科研人員們紛紛開展類似研究,出現(xiàn)了不同的解釋模型。
從生物物理角度來解釋微波的非熱滅菌機(jī)理較易為大多數(shù)人接受,其主要模型包括:
細(xì)胞膜離子通道解釋模型。按照該學(xué)說,細(xì)胞與外界聯(lián)系而進(jìn)行的一系列復(fù)雜的生物化學(xué)過程是依靠細(xì)胞膜上電位差約O.03—0.10V控制的,即膜電位的改變能激活開放或關(guān)閉與外界聯(lián)系的通道。細(xì)菌處于高頻率和強(qiáng)電場(chǎng)強(qiáng)度的微波場(chǎng)中,細(xì)胞膜電位很可能改變,其正常的生理活動(dòng)功能亦將改變,以致危及細(xì)菌的存活。
蛋白質(zhì)變性解釋模型。該理論指出,微生物由蛋白質(zhì)、核酸物質(zhì)和水等極性分子組成,這些極性分子在高頻率、強(qiáng)電場(chǎng)強(qiáng)度的微波場(chǎng)中將隨著微波場(chǎng)極性的迅速改變而引起蛋白質(zhì)分子團(tuán)等急劇旋轉(zhuǎn),往復(fù)振動(dòng),一方面相互間形成摩擦轉(zhuǎn)成熱量而自身升溫,另一方面化學(xué)鍵受到破壞而引起蛋白質(zhì)分子變性,進(jìn)而破壞微生物正常生理活動(dòng)功能,從而達(dá)到殺菌的目的。
1998年,Kozempel提出了四種主要理論假設(shè)來解釋非熱效應(yīng):l、選擇性加熱理論。微生物選擇性吸收電磁波,所以比周圍的液體環(huán)境更熱而更快就達(dá)到滅菌溫度。2、電穿孔現(xiàn)象理論。在電磁場(chǎng)的作用下,在較弱的細(xì)胞膜部分穿孔,引起細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的泄漏和細(xì)胞裂解。3、細(xì)胞膜破裂理論。穿過細(xì)胞膜的電壓足夠使細(xì)胞膜破裂,從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。4、磁場(chǎng)偶聯(lián)理論。用電磁場(chǎng)和細(xì)胞內(nèi)重要分子(如蛋白質(zhì)和DNA)的偶聯(lián)來解釋細(xì)胞的裂解。細(xì)胞內(nèi)部物質(zhì)在電磁場(chǎng)的作用下破壞,從而導(dǎo)致微生物死亡。
同時(shí)有許多研究認(rèn)為存在非熱效應(yīng)影響細(xì)菌的結(jié)構(gòu)和功能,不僅是由熱效應(yīng)造成的。Dreyfuss等研究水浴加熱和微波照射作用金黃色葡萄球菌細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)兩種方法對(duì)金黃色葡萄球菌酶活性影響不同。研究數(shù)據(jù)表明,微波輻射作用金黃色葡萄球菌時(shí),只用熱效應(yīng)不能解釋上菌酶活性變化現(xiàn)象。Tajchakavit等研究了微波加熱對(duì)蘋果汁里的產(chǎn)孢微生物的破壞作用。選擇釀酒酵母菌和胚芽乳桿菌進(jìn)行微波和傳統(tǒng)加熱的對(duì)比試驗(yàn),研究發(fā)現(xiàn),在微波條件下微生物破壞明顯快于水浴加熱。
Rosaspina等對(duì)解剖刀刃上牛結(jié)核桿菌和白色念珠菌污染的微波滅菌效應(yīng)的研究結(jié)果表明,微波可以對(duì)這兩種細(xì)菌污染的解剖刀滅菌。同時(shí)他們還進(jìn)行了初步的機(jī)理研究,當(dāng)用掃
描電子顯微鏡觀察被微波輻照的細(xì)菌時(shí),發(fā)現(xiàn)細(xì)菌經(jīng)歷了一系列變化,暴露時(shí)間越長(zhǎng),這樣的改變?cè)酱?,直至完全破裂。?dāng)用別的方法滅菌時(shí),例如干燥加熱、高溫滅菌或簡(jiǎn)單的在沸水中浸入,即使細(xì)菌死亡,也未發(fā)現(xiàn)形態(tài)學(xué)的變化。解剖刀為金屬,當(dāng)微波長(zhǎng)時(shí)間作用時(shí)溫度會(huì)很高,細(xì)菌的形態(tài)變化可能與解剖刀很高的溫度有關(guān)。
采用微波輻射與水浴加熱,分別對(duì)指示菌如白色葡萄球菌與枯草桿菌黑色變種芽胞懸液等作用相同時(shí)間。在一定溫度條件下,殺滅率差別顯著。研究結(jié)果表明,微波殺菌除熱效應(yīng)外, 還有非熱效應(yīng)。席曉莉等、吳道澄等對(duì)干濕狀態(tài)的細(xì)菌進(jìn)行不同強(qiáng)度及時(shí)間的輻照,比較其殺滅率,并同時(shí)與單純的加熱滅菌相對(duì)比,發(fā)現(xiàn)微波可殺滅干菌,對(duì)濕菌的殺滅也強(qiáng)于單純的加熱滅菌,說明微波對(duì)細(xì)菌的殺滅除熱效應(yīng)外還有非熱效應(yīng)。
Yaghmaee等在真空條件下,使實(shí)驗(yàn)環(huán)境保持在49℃—64℃,使微波滅菌和水浴加熱溫度保持一致,以大腸桿菌為研究對(duì)象,比較三個(gè)參數(shù):D值、z值和活化能(Ea)。結(jié)果表明,微波對(duì)大腸桿菌的破壞明顯不同于水浴加熱,暗示除了微波的熱致死效應(yīng),還有其他因素。微波處理過程中,生物同體剛剛達(dá)到干熱殺菌控制的溫度時(shí),其殺菌效果就已經(jīng)明顯比干熱殺菌效果好,證明微波殺菌過程中存在非熱效應(yīng)機(jī)制。微波是通過抑制或破壞微生物細(xì)胞內(nèi)與生物氧化、呼吸代謝及能量產(chǎn)生有關(guān)的酶的活性來導(dǎo)致細(xì)胞死亡的。微波能夠?qū)滏I、疏水鍵和范德瓦爾斯鍵產(chǎn)生作用,使其重新分配,從而改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象與活性(李巧玲,2001),這些現(xiàn)象說明微波輻射非熱效應(yīng)的存在,是微波作用于生物體上產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的另一種重要機(jī)制。
此外,還有研究者認(rèn)為,電磁波對(duì)化學(xué)反應(yīng)的非熱作用導(dǎo)致了對(duì)生物體的“非熱效應(yīng)”。根據(jù)這一說法,電磁波改變了化學(xué)反應(yīng)的活化能和指前因子,使得反應(yīng)呈現(xiàn)加速和減速兩種結(jié)果。由于生命過程實(shí)際上是一個(gè)動(dòng)態(tài)的代謝平衡過程,時(shí)刻發(fā)生著新陳代謝生物化學(xué)反應(yīng)。因此,電磁波對(duì)生化過程的影響將改變其反應(yīng)速率和平衡常數(shù),致使這樣一種動(dòng)態(tài)的代謝平衡過程發(fā)生紊亂,使生物體的生命受損。非熱效應(yīng)能量不是來自電磁波而是來自于生物體的
新陳代謝如ATP的合成與分解。
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